榆黄蘑液体发酵培养基的优化_免费论文全文下载

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摘要 以菌丝干重为指标，通过单因素和正交试验方法，考察榆黄蘑菌种液体发酵培养基中不同碳源、氮源、无机盐及生长因子的种类和添加剂量。结果表明，最佳培养基配方为马铃薯汁10.00%、葡萄糖1.00%、玉米粉0.30%、黄豆粉0.25%、磷酸二氢钾0.15%、VC 0.001%。该配方碳、氮源取材比较方便，物美价廉，便于大规模工业化发酵生产。

关键词 榆黄蘑；液体发酵；培养基；优化
中图分类号 S646.04 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）09-0078-02
Abstract The dry weight of mycelium was regarded as index，through single factor and orthogonal experimental method，liquid fermentation of Pleurotus citrinopileatus strain type medium of different carbon and nitrogen sources，inorganic salts and growth factors and dosage were studied.The results showed that the best medium formula was as follows：potato juice 10.00%，glucose 1.00%，corn flour 0.30%，soybean flour 0.25%，KH2PO4 0.15%，VC 0.001%.The carbon and nitrogen source of the formula is convenient，inexpensive and convenient for large-scale industrial fermentation production.
Key words Pleurotus citrinopileatus；liquid fermentation；culture medium；optimization
榆�S蘑（Pleurotus eiorinopieutas），又称金顶侧耳（Pleur-otus citrinopileutus），属于担子菌亚门伞菌口蘑科侧耳属[1]。子实体色泽艳丽，体态优美，气味醇香，质地脆嫩，富含多种营养成分，属于高营养、低热量食品，长期食用有降低血压、降低胆固醇含量的功能，可用于治疗肾虚阳痿和痢疾，是心血管疾病患者和肥胖症患者的理想保健食品[2-3]。近年来，随着榆黄蘑需求量的不断增加，子实体价格不断上升，成分提取价格过高导致其深度开发受到限制。利用液体深层发酵技术可以在较短时间内获得大量菌丝体及其发酵产物，其营养价值如蛋白质、多糖和氨基酸的含量均类似或超过子实体[4]。本试验采用单因素及正交试验优化方式，对榆黄蘑摇瓶液体发酵培养基配方和培养条件进行优化，科学统计分析，筛选出适合榆黄蘑液体发酵的最优培养基配方以及最优培养条件，为榆黄蘑的液体发酵培养以及工厂化生产提供一定的理论基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验菌种：榆黄蘑，由延安大学生命科学学院食用菌实验室提供；主要试剂：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、蔗糖、玉米粉、D-麦芽糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸亚铁、VC、V、叶酸等。
1.2 试验方法
在PDA培养基的基础上，设定发酵液母液比例为马铃薯液10%、葡糖糖1%、水100 mL、pH值7.0，在此培养液基础上进行碳源、氮源、无机盐以及生长因子各因素的考察，从而得到最优比例。
1.2.1 不同碳、氮源对榆黄蘑菌丝体液体发酵的影响。分别以D-麦芽糖、2%葡萄糖、蔗糖、玉米粉作为碳源配制4组培养基，以酵母粉、硝酸铵、黄豆粉及0.3%蛋白胨作为氮源配制4组培养基，各取100 mL培养液于250 mL锥形瓶中，每组均设3个平行试验，接种量5%。27 ℃条件下，150 r/min摇床培养7 d后，过滤收集菌丝球并清洗，然后于60 ℃烘箱中烘干称重，记录并计算各处理菌丝体重量的平均值。
1.2.2 不同无机盐、生长因子对榆黄蘑菌丝体液体发酵的影响。将基础液体种子培养基中的MgSO4、FeSO4、KH2PO4含量分别控制在0.1%（分别用0.001% VC、V、叶酸配制发酵培养基），配制3组培养基，每组3个平行。各取100 mL培养液于250 mL锥形瓶中，每组均设3个平行，接种量 5%，27 ℃条件下，150 r/min摇床培养7 d后，过滤收集菌丝球并清洗，然后于60 ℃烘箱中烘干称重，记录并计算各瓶菌丝体重量的平均值。
1.2.3 正交试验设计。对4个因素（碳源、氮源、无机盐、生长因子）各取3个水平，采用L9（34）正交表进行正交试验设计，各因素水平见表1。
2 结果与分析
2.1 不同碳源对榆黄蘑菌丝体液体发酵的影响
由图1可知，以玉米粉作为碳源对榆黄蘑菌丝生物量影响最大，生物量达0.816 g/100 mL，其次是以蔗糖作为碳源。因此，本试验碳源首选玉米粉，其次为蔗糖。
2.2 不同氮源对榆黄蘑菌丝体液体发酵的影响
由图2可知，以麦麸作为氮源对榆黄蘑菌丝生物量的影响最大，其次为蛋白胨和酵母粉，最差为硝酸铵作为氮源。由此表明，该榆黄蘑菌种对有机氮源吸收代谢比较好，而对无机氮源的利用效果不佳。综合考虑经济效益，本试验氮源选用麦麸。
2.3 不同无机盐对榆黄蘑菌丝体液体发酵的影响
由图3可知，3种可利用的无机盐中，磷酸二氢钾对榆黄蘑菌丝的生物量影响最大，其次是硫酸亚铁和硫酸镁。因此，本试验选磷酸二氢钾作为液体发酵所需的无机盐。 2.4 不同生长因子对榆黄蘑菌丝体液体发酵的影响
由图4可知，3种可利用的生长因子中，VC对榆黄蘑菌丝的生物量影响最大，其次是V■和叶酸。因此，本试验选用VC作为榆黄蘑液体发酵中的辅助生长因子。
2.5 正交试验结果
由表2可知，第6组榆黄蘑菌丝生物量最高，可达到0.824 g/100 mL。经极差和直观分析可知，较优组合为A2B3C3D2，按此培养基与试验组合6进行对照试验，菌丝体生物量最高达到 0.853 g/100 mL。因此，榆黄蘑液体发酵菌丝体生长的最适培养基配方为马铃薯汁10.00%、玉米粉0.30%、磷酸二氢钾0.15%、葡萄糖1.00%、黄豆粉0.25%、VC 0.001%。
3 结论与讨论
本试验以榆黄蘑菌丝体干重作为测量指标，确定榆黄蘑液体发酵的最适培养基配方为马铃薯汁10.00%、葡萄糖1.00%、玉米粉0.30%、黄豆粉0.25%、磷酸二氢钾 0.15%、VC 0.001%。
与固体菌种相比，液体菌种生产周期短、菌丝活力强、菌龄整齐一致、接种方便、流动性好，具有较好的开发应用前景[5-6]。作为氮、碳源的黄豆粉、玉米粉是天然有机物质，除提供主要营养外，还含有一些其他辅助因子，同时其取材比较方便，物美价廉，便于大规模工业化发酵生产[7-8]。
4 参考文献
[1] 郑凤荣.榆黄蘑液体深层发酵技术研究[D].北京：中国农业科学院，2007.
[2] 何英，万德云，张玉兴.榆黄蘑提取物对保护肝脏作用的初步探讨[J].中国实验诊断学，2010（9）：1368-1369.
[3] 薛冰，金在久，施溯筠.榆黄蘑干品和鲜品的抗氧化性[J].食品研究与开发，2011，32（3）：23-26.
[4] 李延辉，郑凤荣.榆黄蘑液体深层培养条件的优化研究[J].北方园艺，2010（4）：190-192.
[5] 毛先兵，朱华，李叶敏，等.一种北冬虫夏草液体菌种的生产方法：中国，200910103625[P].2010-10-20.
[6] 曾日秋，汤浩，卢川北，等.不同培养料栽培榆黄蘑试验[J].食用菌，2003（5）：21-22.
[7] 韦珂，李丽瑛，覃培升，等.榆黄蘑液体菌种培养研究[J].北方园艺，2013（20）：131-134.
[8] �钊迩�.榆黄蘑原种液体土法培养[J].食用菌，2012（3）：59.

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